为在太子废立问题上与汉景帝顶牛，后被冤下狱，闭食自尽。当时景帝为了平定七国之乱，巡视关中一带的兵营，鼓舞士气。先到灞上，再到棘门，这两处都不用通报，看到皇帝车架来了后，军营都主动放行。而且两地的主将直到文帝到了才知道消息，迎接时慌慌张张。送景帝走时也是亲率全军送到营寨门口。景帝到了周亚夫的营寨，和先去的两处截然不同。前边开道的被拦在营寨之外，在告知天子要来慰问后，军门的守卫都尉却说：“将军有令，军中只听将军命令，不听天子诏令。”等景帝到了，派使者拿自己的符节进去通报，周亚夫才命令打开寨门迎接。守营的士兵还严肃地告诉景帝的随从：“将军有令：军营之中不许车马急驰。”车夫只好控制着缰绳，不让马走得太快。到了军中大帐前，周亚夫一身戎装，出来迎接，手持兵器向景帝行拱手礼：“介胄之士不拜，请陛下允许臣下以军中之礼拜见。”史书上对于周亚夫拦截景帝的行为大加赞赏，却不知道此事景帝早已埋下杀机。在后来周亚夫被免去丞相位置后，有一回景帝设宴，周亚夫晚到，景帝特以不摆放餐具，借以羞辱周亚夫，随后对当时的太子，后来的汉武大帝说，此人非少主之人臣就是证明。