特征，仍在很大程度上未被探索。在此，我们使用多重定量免疫荧光（QIF）组织分析来评估肺癌相关BRM和原发性肿瘤中主要TIL亚群的差异表达、功能特征和临床意义。
我们还使用QIF测量了PD-L1，用于肿瘤和间质室的局部测量。与肿瘤区室相比，间质区室中PD-L1表达显著降低（比例评分p=0.023，QIF p=0.018），但区室之间存在较强的相关性。
在原发性肺肿瘤中，CD4+表达（r=0.432）和CD8+表达（r=0.418）与PD-L1呈正相关（在线补充图1B）。在BrMs中未观察到这些相关性（在线补充图1C）。在原发性肺肿瘤和BrM中，FOXP3与PD-L1的相关性相似（FOXP3:r=0.395在肺中，r=0.256在BrM中）。
通过TPS和QIF测量，在原发性肺肿瘤和BRM之间观察到类似的肿瘤PD-L1表达（图1C和在线补充图2A和3A）。在配对样本子集中也发现了类似的趋势。
与原发性肺肿瘤相比，BrMs患者的TIL密度显著降低（p<0.0001；图2A、B和在线补充图2和3），肺组织和脑组织微环境的对比。
选择性测定粒酶B作为CD3+T细胞中T细胞活化的标志物或Ki67作为细胞增殖的标志物，显示BrMs中较低的T细胞GZB（p=0.019）和类似的Ki67水平。
使用QIF同时测量CD3+T细胞上的免疫抑制受体（图3A），我们观察到BrMs中的PD-1+（p=0.013）、TIM-3+（p=0.021）和LAG-3+（p=0.008）低于原发性肺肿瘤（图3B和在线补充图2，3）。
在原发性肺（r=0.62–0.79）和BrMs（r=0.64–0.80）中，CD3+T细胞中PD-1、TIM-3和LAG-3表达之间观察到了相对较高的相关性。
CD3+T细
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